Preparát ha-40 ve veterinární praxi
Naléhavost problému imunomodulační léčby v posledních letech výrazně vzrostla a je způsobena následujícími faktory:
1) byly nashromážděny nové informace o struktuře a fungování imunitního systému zvířat-
2) existuje mnoho nových imunomodulačních léků-
3) rozšířil se počet nozologických forem, v jejichž léčbě se používají imunomodulační léky-
4) imunomodulační léčba začala být aktivně zaváděna do praxe nejen imunologů, ale i lékařů jiných odborností.
Je třeba upřesnit, že imunomodulátory jsou léky, které v terapeutických dávkách obnovují narušené funkce imunitního systému. Takové upřesnění je důležité, protože v poslední době jsou různé biologicky aktivní přísady, zakysané mléčné výrobky atd. inzerovány v médiích, v populárně naučných publikacích.P. jako prostředek k normalizaci fungování imunitního systému.
Účelem imunomodulační terapie je zastavit klinické projevy imunodeficience, normalizovat původně změněné parametry imunity a tím zvýšit účinnost terapie základního onemocnění. Indikacemi pro imunomodulační terapii jsou tedy léčba a prevence imunitní nedostatečnosti.
Nejčastější indikací k imunomodulační léčbě je přítomnost syndromu sekundární imunodeficience u nemocného zvířete, nicméně použití imunomodulátorů v komplexní terapii u pacientů s určitými formami primárních imunodeficiencí (například běžná variabilní imunodeficience, selektivní deficit imunoglobulinu A ) také umožňuje dosáhnout určitého zlepšení klinického průběhu onemocnění, pravděpodobně aktivací funkce intaktních částí imunitního systému.
Klinické příznaky sekundární imunodeficience (SID) jsou chronické, často recidivující, pomalé, obtížně léčitelné tradičními prostředky infekčních a zánětlivých onemocnění jakékoli lokalizace způsobených oportunními nebo oportunními mikroorganismy, stejně jako patogenní flóra s atypickými biologickými vlastnostmi a / nebo přítomnost mnohočetné rezistence na antibiotika. Současně mohou být změny v imunologických parametrech přechodné a mohou se tvořit v pozdních stadiích VID při absenci adekvátní terapie základního onemocnění. Syndrom VIN je tedy porucha imunitního systému, která se rozvíjí v pozdním postnatálním období nebo u dospělých, charakterizovaná chronickými infekčními a zánětlivými onemocněními, torpidními až tradiční standardní terapií.
Před zahájením imunomodulační léčby se lékař musí rozhodnout o vhodnosti její implementace, zvolit imunomodulátor a určit dobu jeho užívání.
Historie používání léčivých přípravků vytvořených z rostlin sahá tisíce let do minulosti. Tradičně jsou takové léky mezi pacienty žádané a důvěryhodné. V klinické praxi není vždy možné rychle provést imunologické vyšetření, proto by měl mít praktický lékař jakékoli odbornosti k dispozici lék, který sice šetrně působí na imunitní systém zvířete, ale nemá výrazné vedlejší účinky. Jako takové léčivo lze použít imunomodulátor rostlinného původu GA-40.
Principy imunomodulační terapie doporučené pro použití v klinické praxi:
jeden. Hlavní indikací imunomodulační terapie je léčba a prevence imunodeficience.
2. Základem pro jmenování imunomodulační terapie je přítomnost klinických příznaků imunitní nedostatečnosti.
3. Použití imunomodulátorů by mělo být prováděno na pozadí imunologického sledování.
4. Imunomodulátory jsou předepisovány v komplexní terapii současně s etiotropními chemoterapeutiky.
5. Imunomodulátory mohou být použity jako monoterapie během imunorehabilitačních opatření.
Zařazení imunomodulačních léků do komplexní terapie pacientů s pomalými a dlouhodobými zánětlivými procesy, doprovázenými změnami imunitního stavu vrozené i získané povahy, výrazně zvyšuje účinnost tradiční terapie, může významně zkrátit dobu léčby, zvýšit remisi onemocnění, a tím zlepšit kvalitu života zvířat. V poslední době výrazně vzrostl zájem o imunomodulátory jako prostředek ke zvýšení odolnosti organismu vůči infekci. Rychlost působení imunomodulátorů, jejich vysoká klinická účinnost a bezpečnost použití naznačují příslib této oblasti terapie pro prevenci infekčních onemocnění doprovázených nástupem stavu imunodeficience. Jakákoli patologie je příčinou nebo důsledkem imunologických poruch v těle. V současné době je velká pozornost věnována studiu imunodeficitních stavů, v jejichž přítomnosti zvíře spadá do skupiny zvýšeného rizika onemocnění.
Příčiny imunodeficience jsou velmi rozmanité. Zahrnují faktory in utero, které závisí na organismu matky (primární imunodeficience) a expozici různým imunosupresivním faktorům prostředí (sekundární imunodeficience). Pomalá chronická onemocnění různé etiologie vedou k narušení normálního fungování imunitního systému těla. Nejčastějšími onemocněními tohoto druhu u malých domácích zvířat jsou onkologická onemocnění (35 %), uzavřené pomalé hnisavě-zánětlivé procesy (10-12 %), infekční onemocnění (10 %), parazitární onemocnění (5 %).
Patologické procesy probíhající za výše uvedených stavů vedou ke snížení hladiny cytokinů – molekul signálních polypeptidů imunitního systému, které mohou regulovat interakci hlavních biologických systémů těla – nervového, imunitního a endokrinního. Tato nerovnováha vede ke vzniku nových patologických procesů spojených s oslabením protinádorové, antibakteriální, protiplísňové a antivirové imunity. Dochází k fenoménu celkové imunodeficience, omezují se procesy reparace a regenerace tkání, porušují se ochranné vlastnosti epiteliální tkáně, dochází k dlouhodobé perzistenci infekčního agens v organismu s častými recidivami onemocnění. Při sekundární imunodeficienci zvířata s velkými obtížemi snášejí jakýkoli stres, od přepravy, výměny krmiva, vakcinace až po použití silných antibiotik jako léků.
Přípravek GA-40 je bezpečný regulátor imunitního systému organismu domácích mazlíčků, jinými slovy jde o imunomodulátor příbuzný imunokorektorům imunorehabilitačního typu. Lék byl vytvořen na základě chromatograficky purifikované standardizované kombinace polypeptidů izolovaných z rostlinného materiálu šetrného k životnímu prostředí získaného z oddenků rostliny Kuřená kupena - Polygonatum verticillatum, rodinyLILIACEAE.
Používá se k léčbě a prevenci onemocnění malých domácích zvířat provázených stavy imunodeficience, včetně akutních a chronických zánětlivých reakcí různého původu.
Imunokorektor se pozitivně osvědčil v léčbě a prevenci takových onemocnění malých domácích zvířat jako je masožravá psinka, infekční hepatitida, parvovirová enteritida, demodikóza a sarkoptový svrab u psů, panleukopenie a infekční rinotracheitida u koček, při akutních a chronických zánětlivých reakcích, např. stejně jako systémová plísňová onemocnění doprovázená hlubokou imunosupresí.
Kromě toho byly získány pozitivní výsledky při použití léku pro posílení a zlepšení kvality imunitní odpovědi během očkování. GA-40 má imunokorektivní, protiinfekční a protizánětlivé účinky. Lék zvyšuje celkovou odolnost živočišného organismu vůči patogennímu faktoru, především díky stimulaci funkční aktivity hlavního článku imunity - monocytů a makrofágů. Ty prostřednictvím fagocytózy ničí patogenní mikroorganismy a zároveň stimulují syntézu mediátorů přirozené imunity - cytokinů, které podporují tvorbu protilátek. GA-40 tedy ovlivňuje všechny populace imunokompetentních buněk.
Terapeutický účinek GA-40 se vyznačuje přímým protinádorovým nepřímým, zprostředkovaným cytotoxickým účinkem na buňky nádorových formací, má schopnost zesilovat oslabenou imunitní odpověď organismu nebo vyhlazovat následky neadekvátně silných reakcí. Prakticky ode dne svého vzniku byl z bezpečnostních důvodů experimentálně studován na různých druzích zvířat (myši, bílé krysy, morčata, králíci) na imunotropní aktivitu, imunotoxicitu, alergenicitu, mutagenitu, embryotoxicitu, akutní a chronickou toxicitu, stejně jako studie buněčných a molekulárních mechanismů účinku léčiva GA -40.
Hlavní směry aplikace léku GA-40
prevence a léčba onemocnění zvířat virové, bakteriální a plísňové etiologie
aktivace složek protinádorové imunity
odstranění postvakcinačních komplikací a stresových stavů
léčba sekundárních imunodeficiencí u zvířat
stimulace procesů opravy a regenerace tkání
zvýšení celkové odolnosti organismu
Výhody GA-40
Vysoká účinnost a spolehlivost
Přírodní původ
Žádné škodlivé nečistoty
Může být použit ve spojení se symptomatickou léčbou
Absence kontraindikací a nežádoucích reakcí těla na lék
Dobrá tolerance zvířat potvrzená klinickými testy
Předklinické hodnocení bezpečnosti prováděné podle potřeby "Pokyny pro experimentální (preklinické) studium nových farmakologických látek" (M., 2000), pomocí toxikologických, patomorfologických, biochemických, hematologických metod, neodhalily žádné významné rozdíly v parametrech experimentálních skupin zvířat od kontrolní skupiny, což svědčí o absenci toxických účinků GA-40 ve studovaných dávkách.
Denní pozorování po dobu 3 měsíců a po dobu 6 měsíců neodhalilo žádné odchylky ve stavu a chování zvířat. Statisticky významné změny tělesné hmotnosti potkanů a králíků ani váhových koeficientů vnitřních orgánů oproti kontrolní sérii nebyly zjištěny. U zvířat obou řad je pozorována obvyklá rychlost nárůstu tělesné hmotnosti.
V průběhu studia chronické toxicity GA-40 ve studovaných dávkách u potkanů (terapeutická, 10 a 50násobná terapeutická dávka po dobu 3 měsíců), u králíků (terapeutická, 10 a 50násobná terapeutická dávka po dobu 6 měsíců), nebyly zjištěny statisticky významné odchylky biochemické ukazatele charakterizující funkční činnost parenchymatických orgánů a ukazatele obrazu periferní krve, dále patomorfologické a histostrukturní poruchy vnitřních orgánů.
Denní intraperitoneální podávání GA-40 v dávkách 2, 20 a 100 μg/kg u potkanů nezpůsobilo funkční poruchy kardiovaskulárního, močového systému a neovlivnilo nepříznivě psycho-emocionální a motorickou aktivitu zvířat.
Výsledky studia obecného toxického účinku GA-40 na orgány a systémy těla pokusných zvířat (krys a králíků) tedy naznačují nepřítomnost toxického účinku léku.
V souladu s požadavky FGK byla také provedena studie imunotropního účinku léku. V experimentech in vivo a in vitro byl studován vliv na faktory vrozené a adaptivní imunity.
V experimentech in vivo bylo zjištěno, že podávání léku myším v dávkách 2, 20 a 200 μg/kg nevede ke změně hmoty a celularity sleziny ve srovnání s kontrolními zvířaty. Současně došlo k významnému zvýšení počtu buněk tvořících protilátky o 1,5, 2,4 a 2krát pro 2, 20 a 200 ug/kg, v tomto pořadí, ve srovnání se zvířaty, která lék nedostala. Studované dávky léku neovlivňují hypersenzitivní reakci opožděného typu.
Bylo prokázáno, že subkutánní podání léku myším v dávce 200 μg/kg způsobuje významné zvýšení fagocytární aktivity buněk peritoneálního exsudátu o 20 % a snížení jejich baktericidní aktivity o 17 %. Menší dávky drogy nezpůsobily významný účinek, ale vykazovaly podobné trendy.
Společná kultivace léku v koncentracích 1, 10 a 100 µg/ml s leukocyty periferní krve od zdravých dárců potlačuje chemiluminiscenci závislou na luminolu, neindukovanou i indukovanou zymosanem. V nepřítomnosti zymosanu došlo k významnému poklesu indikátoru o 40 a 62 %, s indukcí zymosanem o 31 a 75 % pro 10 a 100 µg/ml, v tomto pořadí.
Za podmínek in vitro lék v koncentraci 100 µg/ml významně potlačuje cytotoxickou aktivitu NK buněk o 52 % a při koncentracích 1, 10 a 100 µg/ml způsobuje na dávce závislé potlačení neindukovaných a PHA-indukovaná proliferační aktivita lymfocytů periferní krve zdravých dárců. Při použití 100 μg / ml v přítomnosti PHA bylo pozorováno snížení proliferace o 37 % a v nepřítomnosti mitogenu o 54 %.
Bylo prokázáno, že lék v koncentraci 100 μg/ml způsobuje významné zvýšení produkce tumor nekrotizujícího faktoru alfa mononukleárními buňkami periferní krve zdravých dárců.Produkce tohoto cytokinu působením převyšovala produkci klasického induktoru tumor nekrotizujícího faktoru-alfa lipopolysacharid. Koncentrace 10 μg/ml také stimuluje produkci tohoto cytokinu, ale efekt není statisticky významný. Žádná ze studovaných koncentrací (1, 10 a 100 μg / ml) neměla významný vliv na produkci interferonu-gama. Dále bylo zjištěno, že staurosporin a genistein inhibují produkci TNF-b aktivovaného studovaným lékem GA-40. To může naznačovat, že PKC a TRK se podílejí na regulaci produkce cytokinů indukované GA-40.
Mezi PKC se rozlišují jak kinázy závislé na Ca2+, tak kinázy nezávislé na Ca2+. Další fází studie proto bylo vyhodnocení účinku GA-40 na akumulaci intracelulárního vápníku za účelem vyloučení jedné nebo druhé skupiny CSW. Lék nezpůsobil zvýšení intracelulárního vápníku v buňkách periferní krve a významně potlačoval tento indikátor v lymfocytech a neutrofilech aktivovaných Ca2+ ionoforem - A23187.Je možné, že GA-40 zabraňuje nadměrné aktivaci buněk snížením intracelulární mobilizace Ca2+, nebo je účinek léčiva na buňku prováděn Ca2+-nezávisle, tzn.E. proces s největší pravděpodobností zahrnuje PKC ze skupiny nových nebo atypických, nezávislých na Ca2+ a aktivovaných fosfatidylserinem. Tento předpoklad byl potvrzen inhibiční analýzou. Studie ukázaly, že proces aktivace buněk působením GA-40 zahrnuje PKCe ze třídy nových. Ale kromě toho se klasické Ca2+-dependentní proteinkinázy také účastní GA-40-zprostředkované buněčné aktivace.
Vzhledem ke skutečnosti, že PKC asociované s fosfatidylserinem se podílejí na aktivaci buněk působením GA-40, lze předpokládat, že testovaný lék interaguje s buněčnou membránou. Interakce může být buď receptorová, nebo s fosfolipidy, glykoproteiny (Kilpatrick DC., 1999) nebo jiné složky buněčné membrány.
Z literárních údajů je známo, že intracelulární signální dráhy spojené s aktivací PKC vedou k aktivaci jaderného faktoru NF-kB (Yarilin A.A., 1999). Vezmeme-li v úvahu získaná data týkající se zapojení RCM a indukce cytokinové odpovědi pomocí GA-40, zdá se, že NF-kB je nejpravděpodobnějším cílem pro působení GA-40.
Experimentální data tento předpoklad potvrdila. V jaderných extraktech buněk lidské monocytární linie U937, inkubovaných v přítomnosti 100 μg/ml léčiva, byla nalezena podjednotka p65 NF-kB. Tato skutečnost nám umožňuje s vysokou mírou pravděpodobnosti předpokládat, že konečnou fází signalizace indukované GA-40 je aktivace transkripčního faktoru NF-kB.
NF-kB reguluje expresi cytokinů, růstových faktorů a enzymů podílejících se na tvorbě reaktivních forem kyslíku, zejména peroxidu vodíku. Přidání léčiva k leukocytům v maximálních testovaných koncentracích způsobilo významný pokles intracelulárního peroxidu vodíku. Možná je tento účinek spojen s antioxidačním účinkem léku a potvrzuje výsledky získané v předchozích studiích (vliv na chemiluminiscenci leukocytů). Nebo lék zapíná jiné signální dráhy, které potlačují nadměrnou aktivaci buněk.
Je tedy možné nastínit některé fáze buněčné aktivace působením přípravku GA-40. Lék GA-40 interaguje s některými membránovými strukturami (receptory lektinů, receptory T-buněk, fosfolipidy, glykoproteiny nebo jiné struktury buněčné membrány), které se zjevně nacházejí hlavně na lymfocytech. V důsledku toho dochází ke změnám ve struktuře fosfatidylserinu a aktivaci tyrosinových proteinkináz, a to jak Ca2+-dependentních (PKC6, PKCg), tak Ca2+-independentních proteinkináz C (PKCe). Proteinkinázová dráha vede k aktivaci transkripčního faktoru NF-kB a jeho translokaci do jádra. Aktivace NF-kB se projevuje zvýšením produkce TNF-b. Nelze vyloučit zahrnutí dalších signálních drah a jejich interakci, protože je pozorován nejednoznačný účinek léku na buňky (potlačení produkce peroxidu vodíku, žádné zvýšení exprese kostimulačních molekul makrofágy).
Na základě získaných výsledků lze usoudit, že lék "GA-40" má výrazný imunotropní účinek, aniž by poskytoval imunotoxický účinek.V klinických studiích byl lék používán v případech léčby malých domácích zvířat, zejména koček a psů, a v důsledku toho vykazoval antineoplastickou imunotropní aktivitu u zvířat. Bohužel jsme nevedli evidenci, t.j.Na. probíhaly klinické zkoušky. Ale velké množství koček a psů bylo léčeno na infekční onemocnění, sekundární imunodeficience, toxické poškození jater atd. orgány, nádory různých typů. Výsledky jsou prakticky totožné s výsledky léčby u lidí.
Jaké faktory máme ve prospěch použití HA-40 ve veterinární medicíně??
jeden. Peptidy v přípravku rostlinného původu jsou starověkého původu a jsou živočišnými organismy přijímány jako podobné nebo identické peptidy.
2. Jak víme, signální systém receptor-leukin-odpověď ve všech svých projevech je identický u všech živočišných organismů.
3. Vzhledem k tomu, že 1 mg GA-40 obsahuje více než 800 peptidů s nízkou molekulovou hmotností, je do procesu odezvy zapojeno velké množství různých receptorů, které poskytují široké spektrum účinku léčiva a ovlivňují nejen hlavní příčiny onemocnění, ale i ty doprovodné.
Experimentálně ověřené a klinicky pozorované antisklerotické, antioxidační, protizánětlivé, antistresové účinky na organismus, vylučování těžkých kovů ledvinami bez poškození atd.pozitivní projevy.
4. Lék nemá žádné vedlejší účinky (jedinou kontraindikací je preimplantační těhotenství, t.j.E. první třetina období březosti), která má ve veterinární praxi velký význam, t.j.Na. příznaky komplikací a předávkování při užívání veterinárních léčivých přípravků nejsou tak účinně diagnostikovány jako u lidí.
5. Lék je snadno použitelný - jedna injekce denně, s inzulínovou stříkačkou, subkutánně, malá dávka a bezbolestný postup.
Imunomodulátory rostlinného původu mají jasné výhody oproti lékům mikrobiologického a syntetického původu. Nejprve jednají "měkký", tím nejpřirozenějším a fyziologickým způsobem. Za druhé, prakticky nezpůsobují vedlejší reakce. A konečně, a to je možná nejdůležitější, ovlivňují různé části patologického procesu. Syntetické léky buď posilují imunitní systém, nebo jej oslabují.
